揭秘D-氨基酸氧化酶:从结构特性到工业催化全解析
D-氨基酸氧化酶(DAAO)是一种依赖黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)的需氧脱氢酶,通过催化D-氨基酸的氧化脱氨基反应生成α-酮酸和氨,同时利用分子氧将还原型FAD重新氧化并产生过氧化氢。该酶广泛参与外源性氨基酸代谢、神经递质调控及细胞壁合成等生理过程,在生物体内发挥重要功能。
对DAAO的研究可追溯至20世纪20年代,早期研究聚焦于其酶学性质与底物特异性,发现其对疏水性D-氨基酸(如D-丙氨酸、D-苯丙氨酸)具有立体异构专一性,而对酸性D-氨基酸无催化活性。结构解析表明,DAAO通常以二聚体或多聚体形式存在,活性中心包含Tyr224、Tyr228及Arg283等关键残基,辅酶FAD通过非共价结合参与催化反应。
D-氨基酸氧化酶的生产工艺关键步骤:
菌株构建:利用基因工程技术改造宿主菌(如大肠杆菌或酵母),插入编码DAAO的基因以实现高效表达。
发酵培养:在优化培养基中大规模培养菌株,通过调控温度、pH及诱导剂(如IPTG)控制酶表达水平。
酶提取:离心收集菌体后,通过超声或高压均质破碎细胞释放酶蛋白,再次离心去除细胞碎片。
纯化:采用亲和层析、离子交换层析或结晶法分离纯化酶,去除杂质蛋白与非目标成分。
干燥保存:将纯化后的酶液冻干或喷雾干燥成粉末,密封后于-20℃避光保存以维持活性。
什么是D-氨基酸氧化酶
D-氨基酸氧化酶是一种以FAD为辅基的黄素蛋白,通常呈黄色粉末状,由两个相同亚基组成,每个亚基含一个铁原子,分子量因来源不同而有所差异。其难溶于水,微溶于酸、碱盐溶液,不溶于乙醇和乙醚。作用机制上,该酶通过催化D-氨基酸的氧化脱氨基反应生成α-酮酸和氨,同时利用分子氧将还原型FAD再氧化,并产生过氧化氢。在生物体内,DAAO通过代谢外源性D-氨基酸防止毒性积累,并调控D-丝氨酸浓度以影响NMDA受体信号传递。
D-氨基酸氧化酶应用何处
我们的D-氨基酸氧化酶
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魏氏试剂黄金产品
名称 |
cas号 |
含量 |
库存 |
D-氨基酸氧化酶 |
9000-88-8 |
活力≥50u/g |
有 |
单胺氧化酶 |
9001-66-5 |
纯度≥90% |
有 |
辅羧酶四水物 |
68684-55-9 |
含量96~101% |
有 |
变旋酶/MUTA |
9031-76-9 |
活力≥80U/mg |
有 |
苹果酸脱氢酶 |
9001-64-3 |
纯度≥90% |
有 |
谷丙转氨酶 |
9000-86-6 |
纯度≥90% |
有 |
共脂肪酶 |
55126-92-6 |
活力≥4000U/mg |
有 |
脱氧核糖核酸酶Ⅰ(牛胰) |
9003-98-9 |
比活度≥2000 Kunitz units/mg |
有 |
胰蛋白酶 |
9002-07-7 |
含量≥2500USP.U/mg |
有 |
γ-谷氨酰转肽酶 |
9046-27-9 |
活力≥5 U/mg |
有 |
【魏氏试剂】
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